E. D. Mytsa ، L.Yu. کوکاوا ، S.N. الانسکی
Oomycete فیتوفتورا بیگانگان (مونت) د باری باعث بیماری دیررس ، بیماری خطرناک سیب زمینی و گوجه فرنگی می شود. یکی از منابع اصلی تلقیح اولیه P. infestans ساختارهای تولید مثل در حالت استراحت با دیواره ضخیم هستند.
oospores ترکیبی تشکیل شده در نتیجه عبور از سویه های مختلف والدین از نظر ژنتیکی ، به افزایش تنوع ژنوتیپی در جمعیت کمک می کند ، در نتیجه روند انطباق سویه ها با انواع جدید و قارچ کش های اعمال شده تسریع می شود.
تشکیل اووسپور P. infestans روسیه (Smirnov و همکاران ، 1999) ، نروژ (Hermansen و همکاران ، 2002) ، سوئد (Strgmberg و همکاران ، 2001) ، هلند (Kessel و همکاران ، 2002) و دیگران مناطق Oospores قادر است بیش از 2 سال در خاک زنده بماند (Bødker et al.، 2006) و پس از زمستان گذرانی باعث عفونت گیاه شود (Ulanova et al.، 2010؛ Lehtinen et al.، 2002).
پیش از این نشان داده شد که برگهای گیاهان طبقات مختلف بوته سیب زمینی در مقاومت در برابر بیماری دیررس تفاوت دارند. از برگهای پایین به قسمتهای بالایی افزایش می یابد. این روند به سن برگ ، سن گیاه و انواع سیب زمینی بستگی ندارد (Vesper et al.، 2003). در همان زمان ، ما موفق به یافتن اطلاعات مربوط به تفاوت در شدت تشکیل اووسپور در برگهای طبقات مختلف بوته سیب زمینی در ادبیات نشدیم. با این حال ، اگر چنین اختلافاتی وجود داشته باشد ، باید هنگام گرفتن نمونه برگ برای تجزیه و تحلیل تشکیل اووسپور و تفسیر نتایج به دست آمده توسط سایر نویسندگان ، آنها را در نظر گرفت. هدف از این کار بررسی شکل گیری اووسپورها در برگهای جدا شده از لایه های مختلف یک گیاه سیب زمینی بود که در اتاق های مرطوب در شرایط یکسان قرار گرفتند.
مواد و روش ها
ما از 5 جدایه استفاده کردیم P. infestans انواع مختلف جفت گیری جدا شده از نمونه های آسیب دیده از مناطق مسکو ، ریازان و لنینگراد. از این تعداد ، 3 جفت سویه از انواع مختلف جفت گیری ، هنگام آزمایش در محیط بلغور جو دوسر ، به اوسپورهای فراوانی انتخاب شدند.
برای آزمایش ، ما از گیاهان سیب زمینی عاری از ویروس از انواع زیر که در گلخانه (در بستر ذغال سنگ نارس) پرورش داده شده استفاده می کنیم: ساندرین اولیه ، زوراچکا ، اولادار ، اوزیریس ، اواسط اوایل ایلینسکی ، اواسط فصل یانکا.
برگهای ساده از سطوح مختلف گیاه سیب زمینی برای تجزیه و تحلیل انتخاب شدند. سه برگ از سطح پایین (4 برگ مرکب پایین) ، سه برگ از بالا (3-4 برگ مرکب در بالا) و سه برگ از مرکز بوش انتخاب شدند. برگهای ساده را توزین کردند ، روی کاغذ مختصات عکس گرفتند (برای محاسبه حجم و مساحت) ، و سپس وارونه بر روی سطح آب استریل قرار دادند و 25 میلی لیتر در ظروف پتری ریختند. سپس هر برگ با یک قطره از سوسپانسیون مخلوط جدا شده از zoosporangia جدا شده A1 و A2 از نوع جفت گیری آلوده شد. برای سه برگ جمع آوری شده از هر سطح ، از تلقیح سه جفت جداگانه استفاده شد. یک برگ به مخلوط تلقیح یک جفت جدا شده آلوده شد.
برای تهیه سوسپانسیون zoosporangia ، جدایه های مختلف جفت گیری در محیط جو دوسر آگار به مدت 7 روز رشد داده شد و پس از آن zoosporangia با آب مقطر استریل شسته شد. غلظت تلقیح 5-7 زئوسپور در میدان دید میکروسکوپ با بزرگنمایی 80 برابر بود. هر برگ با یک قطره سوسپانسیون مخلوط جدا شده از زئوسپورانژی جدا شده از نوع جفت سازی A1 و A2 آلوده شد.
در تمام آزمایشات ، از 3 برگ سیب زمینی در هر نوع استفاده شد. پس از انکوباسیون به مدت 20 روز در دمای 18 درجه سانتیگراد ، هر برگ در یک هاون با 2 میلی لیتر آب مقطر همگن شد. از سوسپانسیون حاصل ، 3 نمونه گرفته شد که از آنها آماده سازی میکروسکوپ تهیه شد.
در هر نوع ، 180 زمینه بصری مورد بررسی قرار گرفت ، و پس از آن تعداد oospores در هر 1 میلی متر دوباره محاسبه شد2 سطح ورق نتایج شمارش برای هر نوع به طور متوسط انجام شد.
برای محاسبه فاصله اطمینان (μ) برای سطح معناداری 0,05/XNUMX ، از فرمول زیر استفاده شد
که در آن s انحراف استاندارد است ، n تعداد اندازه گیری ها است ، t ثابت t آزمون برای سطح معنی داری 0,05 است. تمام محاسبات در اکسل (بسته Microsoft Office) انجام شده است.
نتایج و بحث
تلقیح برگ هایی که از لایه های مختلف بوته سیب زمینی جمع آوری شده و در همان شرایط در محفظه های مرطوب قرار گرفته اند ، تفاوت در شدت تشکیل اووسپور را نشان می دهد. در تمام ارقام مورد مطالعه ، حداکثر تعداد اووسپورها با تلقیح برگهای جمع آوری شده از طبقات پایین و میانی بوته تشکیل شد. تفاوت معنی داری در تشکیل اووسپورها در برگهای تحتانی و میانی مشاهده نشد.
حداقل تعداد اووسپورها در برگهای لایه فوقانی تشکیل شده است (شکل 1).
در برگهای طبقات پایین و میانی ، حداکثر تعداد اوسپورها در انواع Sandrin ، Ilyinsky ، Zorachka ، Uladar و Osiris تشکیل شد. آنها تا حدودی با شدت کمتری در برگهای گونه یانکا تشکیل می شوند. حداکثر تعداد اووسپورها در برگهای لایه فوقانی در برگهای گونه Uladar مشاهده شد ، سپس Zorachka ، Osiris ، Yanka ، Ilyinsky ، Sandrin به ترتیب کمتری رفت ، اما همه اختلافات از نظر آماری معنی دار نبودند.
شکل: 1. تشکیل اووسپورها در برگ لایه های مختلف بوته سیب زمینی. قسمتهای پایین برگهای سه سطح پایین بوته است ، قسمتهای فوقانی 3-4 برگ پیچیده از بالای گیاه است ، وسط آن از وسط بوش است.
میله های خطا فاصله اطمینان را برای سطح معناداری 0,05/XNUMX نشان می دهند.
در این زمینه ، شرایط میکروکلیمایی همچنین به تشکیل اووسپورها در برگهای پایین و میانی بوش کمک می کند: رطوبت بالاتر ، کاهش میزان خلوص خورشید و نوسانات دمای روزانه (هریسون ، 1992). سمپاشی بالا باعث کاهش سموم دفع آفات در پایین و مرکز بوش می شود. برای کاهش تشکیل اووسپورها ، باید از فناوری هایی استفاده شود که امکان انتقال موفقیت آمیز قارچ کش ها به قسمت های تحتانی و میانی بوش را داشته باشد. با استفاده از سمپاش های آشفته هوا و قارچ کش های سیستمیک که می توانند به قسمت های درمان نشده بوش گسترش پیدا کنند ، نتایج خوبی می توان بدست آورد.
این کار توسط بنیاد علمی روسیه (پروژه شماره 14-50-00029) پشتیبانی شد.
مقاله در ژورنال "حفاظت از سیب زمینی" (شماره 2 ، 2015) منتشر شد